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台灣阿嬤蝴蝶蘭(Phalaenopsis aphrodite subsp...

國立高雄大學生物科技研究所

台灣阿嬤蝴蝶蘭(Phalaenopsis aphrodite subsp. formosana)胚珠及種子發育之型態觀察與細胞核DNA含量分析 = Morphological observation and nuclear DNA content analysis in ovule and seed development of Phalaenopsis aphrodite subsp. formosana

紀錄類型:	書目-語言資料,印刷品 : 單行本
並列題名:	Morphological observation and nuclear DNA content analysis in ovule and seed development of Phalaenopsis aphrodite subsp. formosana
作者:	簡廣霆,
其他團體作者:	國立高雄大學
出版地:	[高雄市]
出版者:	撰者;
出版年:	2008[民97]
面頁冊數:	110面圖,表 : 30公分;
標題:	核內再複製
標題:	Embryo development
電子資源:	http://handle.ncl.edu.tw/11296/ndltd/83610166770113485232
附註:	指導教授：陳文輝
附註:	參考書目：面93-98
其他題名:	臺灣阿嬤蝴蝶蘭(Phalaenopsis aphrodite subsp. formosana)胚珠及種子發育之型態觀察與細胞核DNA含量分析
摘要註:	在高度分化的植物細胞中，會經過僅有染色體DNA進行複製卻未細胞分裂的內生性複製 (Endoreduplication) 現象，而造成在單一個體中含有不同套數染色體的細胞，此現象稱為內生性多倍化 (Endopolyploidy) 。內生性多倍化會使植物體細胞形成多倍體 (Polyploidy) 的嵌合體 (Chimera) ，除了在自然界中本身即可發生之外，也常被應用在傳統育種上，以解決遠緣雜交中的雜交不親和性與雜種不孕性的問題。本研究以台灣阿嬤蝴蝶蘭 (Phalaenopsis aphrodite subsp. formosana) 為實驗材料，主要在於觀察二倍體台灣阿嬤蝴蝶蘭授粉後不同天數子房與有性胚發育的情形，並利用流式細胞儀測定胚珠部位細胞核DNA含量的變化。受粉後的子房在4~7天中逐漸轉紅，並且由靠近花器的部位開始膨大並形成果莢，到受粉後71天 (71 DAP) 果莢會變為綠色，受粉後99天果莢內種子逐漸成熟，此時果莢維持在長度約5.8公分，寬度約1.2公分的狀態。在顯微鏡下觀察發現，胎座末端的小細胞團分裂生長至受粉後43天具有胚珠的外型，之後胚珠開始延長，在受粉後99天逐漸形成成熟種子。以流式細胞儀測定受粉後不同時期胚珠的細胞核DNA含量，發現胚珠在授粉後43天會具有1C的細胞核，推測此期可能進行減數分裂，並於授粉後50到57天進行授精而生成接合子 (Zygote) ，直到授粉後85天為止，胚珠出現大量4C的細胞核，推測接合子會不斷進行旺盛的細胞分裂以生成胚體，而授粉後92天到99天細胞分裂速率則漸漸降低，到受粉後140天的種子其細胞分裂已接近終止；同時以DAPI螢光染色觀察發現，授粉後99天種皮細胞核已經完全消失，這表示受粉後99天~140天種子逐漸步向成熟，胚體內的細胞開始進入靜止期，而這段時間仍然可偵測4C細胞核的存在。另外，取授粉後120天以上的成熟種子，測定其播種後成長不同天數的核DNA含量變化，發現種子在播種後4~10天已偵測到4C及8C細胞核的存在，顯示染色體已產生多倍化的現象。由以上結果顯示，台灣阿嬤蝴蝶蘭的有性胚進入內生性多倍化的起始點，可能位於受粉後90天到140天之種子成熟的時期中。利用Zeiss螢光影像澄清化顯微系統分析受粉後140天之種子與播種後20天之原球體的不同大小細胞核分佈，發現大型細胞核都是集中在胚體基部中心的位置，因此推測內生性多倍化的起始位置應該在胚體基部中心。在大部分的植物中，種子在播種後才會開始產生內生性多倍化現象，並且在長出胚根時進行第一次的細胞分裂，而胚體本身在播種前並無內生性多倍化的現象；本實驗則發現，在台灣阿嬤蝴蝶蘭種子成熟時期中已存在內生性多倍化的現象，比前人研究所發現時間較為提早，此現象的生理意義有賴未來更深入的研究。 In highly differentiated plant cells, the cells may undergo endoreduplication, i.e. synthesis of chromosomal DNA occurs in the incomplete of mitosis, resulting in different ploidy levels within an organism called endopolyploidy. Endopolyploidy results in plants becoming polyploidy. The phenomenon occurs not only in the nature, but also it can be applied in traditional breeding to resolve hybridization incompatibility and sterility in distant hybridization. Our research includes the morphological observation of the ovary and sexual embryo development and the flow cytometric analysis of nuclear DNA content of ovule in Phalaenopsis aphrodite subsp. formosana during different days after pollination. The ovary turned red on 4 to 7 days after pollination (DAP) . The part of the ovary near the petal began growing large and became a capsule. Then and the capsule turned green at 71 DAP. At 99 DAP, the seeds in capsule were

台灣阿嬤蝴蝶蘭(Phalaenopsis aphrodite subsp. formosana)胚珠及種子發育之型態觀察與細胞核DNA含量分析 = Morphological observation and nuclear DNA content analysis in ovule and seed development of Phalaenopsis aphrodite subsp. formosana
簡, 廣霆

台灣阿嬤蝴蝶蘭(Phalaenopsis aphrodite subsp. formosana)胚珠及種子發育之型態觀察與細胞核DNA含量分析 = Morphological observation and nuclear DNA content analysis in ovule and seed development of Phalaenopsis aphrodite subsp. formosana / 簡廣霆撰 - [高雄市] : 撰者, 2008[民97]. - 110面 ; 圖,表 ; 30公分.
指導教授：陳文輝參考書目：面93-98.
核內再複製Embryo development

台灣阿嬤蝴蝶蘭(Phalaenopsis aphrodite subsp. formosana)胚珠及種子發育之型態觀察與細胞核DNA含量分析 = Morphological observation and nuclear DNA content analysis in ovule and seed development of Phalaenopsis aphrodite subsp. formosana
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330 $a 在高度分化的植物細胞中，會經過僅有染色體DNA進行複製卻未細胞分裂的內生性複製 (Endoreduplication) 現象，而造成在單一個體中含有不同套數染色體的細胞，此現象稱為內生性多倍化 (Endopolyploidy) 。內生性多倍化會使植物體細胞形成多倍體 (Polyploidy) 的嵌合體 (Chimera) ，除了在自然界中本身即可發生之外，也常被應用在傳統育種上，以解決遠緣雜交中的雜交不親和性與雜種不孕性的問題。本研究以台灣阿嬤蝴蝶蘭 (Phalaenopsis aphrodite subsp. formosana) 為實驗材料，主要在於觀察二倍體台灣阿嬤蝴蝶蘭授粉後不同天數子房與有性胚發育的情形，並利用流式細胞儀測定胚珠部位細胞核DNA含量的變化。受粉後的子房在4~7天中逐漸轉紅，並且由靠近花器的部位開始膨大並形成果莢，到受粉後71天 (71 DAP) 果莢會變為綠色，受粉後99天果莢內種子逐漸成熟，此時果莢維持在長度約5.8公分，寬度約1.2公分的狀態。在顯微鏡下觀察發現，胎座末端的小細胞團分裂生長至受粉後43天具有胚珠的外型，之後胚珠開始延長，在受粉後99天逐漸形成成熟種子。以流式細胞儀測定受粉後不同時期胚珠的細胞核DNA含量，發現胚珠在授粉後43天會具有1C的細胞核，推測此期可能進行減數分裂，並於授粉後50到57天進行授精而生成接合子 (Zygote) ，直到授粉後85天為止，胚珠出現大量4C的細胞核，推測接合子會不斷進行旺盛的細胞分裂以生成胚體，而授粉後92天到99天細胞分裂速率則漸漸降低，到受粉後140天的種子其細胞分裂已接近終止；同時以DAPI螢光染色觀察發現，授粉後99天種皮細胞核已經完全消失，這表示受粉後99天~140天種子逐漸步向成熟，胚體內的細胞開始進入靜止期，而這段時間仍然可偵測4C細胞核的存在。另外，取授粉後120天以上的成熟種子，測定其播種後成長不同天數的核DNA含量變化，發現種子在播種後4~10天已偵測到4C及8C細胞核的存在，顯示染色體已產生多倍化的現象。由以上結果顯示，台灣阿嬤蝴蝶蘭的有性胚進入內生性多倍化的起始點，可能位於受粉後90天到140天之種子成熟的時期中。利用Zeiss螢光影像澄清化顯微系統分析受粉後140天之種子與播種後20天之原球體的不同大小細胞核分佈，發現大型細胞核都是集中在胚體基部中心的位置，因此推測內生性多倍化的起始位置應該在胚體基部中心。在大部分的植物中，種子在播種後才會開始產生內生性多倍化現象，並且在長出胚根時進行第一次的細胞分裂，而胚體本身在播種前並無內生性多倍化的現象；本實驗則發現，在台灣阿嬤蝴蝶蘭種子成熟時期中已存在內生性多倍化的現象，比前人研究所發現時間較為提早，此現象的生理意義有賴未來更深入的研究。 In highly differentiated plant cells, the cells may undergo endoreduplication, i.e. synthesis of chromosomal DNA occurs in the incomplete of mitosis, resulting in different ploidy levels within an organism called endopolyploidy. Endopolyploidy results in plants becoming polyploidy. The phenomenon occurs not only in the nature, but also it can be applied in traditional breeding to resolve hybridization incompatibility and sterility in distant hybridization. Our research includes the morphological observation of the ovary and sexual embryo development and the flow cytometric analysis of nuclear DNA content of ovule in Phalaenopsis aphrodite subsp. formosana during different days after pollination. The ovary turned red on 4 to 7 days after pollination (DAP) . The part of the ovary near the petal began growing large and became a capsule. Then and the capsule turned green at 71 DAP. At 99 DAP, the seeds in capsule were
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